Laboratoire de Spectrométrie de Masse Protéomique (LSMP)

Activité

La plateforme du Laboratoire de spectrométrie de masse protéomique (LSMP) est ouverte à l’ensemble de la communauté scientifique et offre un service de pointe aussi bien aux chercheurs de l’Institut Curie qu’à des collaborateurs d’établissements nationaux et internationaux. L’activité proposée par le LSMP est réalisée par et pour du personnel de recherche.

Le LSMP mène en parallèle une activité de développement méthodologique et bio-informatique. En effet, il conçoit, adapte des stratégies et développe des approches innovantes pour faire de l’analyse globale, identifier des partenaires protéiques minoritaires et des modifications post-traductionnelles. Certains projets, impliqués dans d’importantes questions biologiques ou biomédicales, vont utiliser et appliquer les méthodologies et technologies existantes. D’autres, qui sont techniquement plus difficiles vont nécessiter le développement de nouvelles approches, réactif ou logiciel.

Objectifs

Le LSMP fournit aux chercheurs des services/outils pour leur permettre d’analyser les protéines (identification de protéines, comparaison de protéomes, analyse de modifications post-traductionnelles, identification de partenaires interagissant avec la protéine d’intérêt,  …) par spectrométrie de masse. L’une des approches les plus prometteuses est de pouvoir combiner l’analyse qualitative et quantitative dans une seule injection (pour les échantillons de la recherche, cela signifie une sensibilité élevée et une quantification de l’ensemble des protéines identifiées). L’objectif est de fournir à nos collaborateurs des hypothèses scientifiques plus rapidement, afin de pouvoir valider fonctionnellement nos candidats quantifiés.

Réseaux et collaborations

Le LSMP est une plateforme du Cancéropôle Ile-de-France co-labélisée IBiSA en partenariat avec l’ESPCI pour créer la « plateforme protéomique Montagne Sainte Geneviève »  (ESPCI/Institut Curie). Le LSMP est associé au réseau des plateformes protéomiques parisiennes, à la Société Française d’Electrophoresèse et d’Analyse Proteomique (SFEAP) et à la Société française de spectrométrie de masse (SFSM) qui est membre de l’EuPA et de HUPO.

Prestations

Le LSMP fonctionne selon deux modes :

Collaboration : une personne de l’équipe demandeuse est accueillie et formée à la préparation et au traitement des données. La participation aux frais d’analyses demandée permet de financer les maintenances et les consommables, le reste étant pris en charge par l’IC.

Service : il est laissé au choix pour chaque projet de fonctionner sur la base du service dans le cas où la co-signature n’est pas souhaitée. Le coût des analyses inclut alors également le salaire du personnel, les charges de structure et le renouvellement des investissements.
Les services fournis:

• Définition et conception du dessin expérimental
• Conseils concernant la mise en place du projet
• Conseils et aide à la préparation de l’échantillon / contrôle qualité
• Identification des protéines et peptides
• Comparaison de protéomes
• Mesure de masse à haute résolution
• Analyse des modifications post-traductionnelles (localisation et caractérisation).
• Protéomique ciblée
• Protéomique quantitative (SILAC, IDA SWATH, Label free…)
• Traitement des données
• Analyse bioinformatique et statistique

Formations

Le LSMP fournir à ses utilisateurs trois types de formation :

• personnalisé pour réaliser une partie des analyses;
• avancées sur tous les aspects de la protéomique (définir les questions et conception du dessin expérimental, préparation des échantillons, analyse MS, et traitement des données MS);
• au développement de nouvelles approche et outils MS.

De plus, le LSMP s’est fortement impliqué dans la mise en place d’un outil informatique d’analyse de données qui permet de gérer l’ensemble de ses collaborations. myProMS (Poullet et al, Proteomics, 2007) est un outil développé en collaboration avec l’U900 (plateforme de bio-informatique de l’IC). Il se présente sous la forme d’un serveur web adossé à une base de données relationnelle qui permet le stockage, l’interprétation et la validation des spectres obtenus par spectrométrie de masse. Il s’inscrit dans une démarche d’innovation constante et de qualité. Il a été régulièrement enrichi pour permettre de traiter des données toujours plus complexes (données quantitatives marquées et non marquées, modifications post-traductionnelles,…) et de fournir une aide dans l’interprétation de ces résultats. myProMS est distribué gratuitement à l’ensemble de la communauté scientifique et équipe 3 plateformes de protéomique en France (ESPCI, Institut Cochin et IGF à Montpellier).

Équipements

• Thermo Scientific^TM  Orbitrap Fusion^TM Tribrid^TM MS
• Thermo Scientific^TM Ultimate^TM 3000 RSLCnano LC system
• Thermo Scientific^TM  Dionex^TM Ultimate^TM 3000 AFC Automated Fraction collector
• AB SCIEX^TM  TripleTOF® 6600 MS
• AB SCIEX^TM  4800 Plus MALDI TOF/TOF^TM MS (2008, Applied Biosystems™)
• Dionex/LC-Packings Probot^TM Micro Fraction Collector
• Agilent 3100 OFFGEL Fractionator
• Bio-Rad PROTEAN® IEF Cell
• myProMS  web server
• Thermo Scientific^TM Proteome Discoverer^TM 2.0 software
• Thermo Scientific^TM Pinpoint^TM 1.4 software
• Database search algorithms (SEQUEST HT, Matrix Science Mascot Server and Daemon 2.5, AB SCIEX ProteinPilot 5.0, …)
• AB SCIEX^TM  PeekView® 2.1 software
• Trans-Proteomic Pipeline (TPP 4.8, ) tools

Manager(s) et contact(s)

Membres du LSMP

• Damarys LOEW : directeur
• Bérangère LOMBARD : ingénieur MS
• Florent DINGLI: ingénieur MS
• Guillaume ARRAS: ingénieur bioinformatique
• Vanessa MASSON: ingénieur bio/MS
• Marine LE PICARD: ingénieur bioinformatique